FIREScript® FLEX H(-) KIT

Opis

FIREScript® FLEX H(-) KIT to termostabilna odwrotna transkryptaza przeznaczona do syntezy cDNA na matrycy RNA lub jednoniciowego DNA (ssDNA). Enzym został zaprojektowany z myślą o czułej syntezie cDNA i stabilnej pracy w wymagających warunkach.

Szybka synteza cDNA: 5–10 minut.
Szeroki zakres temperatur pracy: 37–70°C.
Wysoka stabilność termiczna; po obróbce w 65°C przez 30 minut wartości Cq pozostają zbliżone.
Wysoka procesywność, również przy długich i złożonych matrycach RNA (>12 kb).
Stabilność podczas przygotowywania reakcji w temperaturze pokojowej, bez konieczności pracy na lodzie.
Przeznaczony wyłącznie do badań naukowych (Research Use Only).

Ordering (Zamawianie)

Numer katalogowy: 06-63-0000S

Dostępne wielkości opakowań:

20 reakcji — 20 × 20 µl (bezpłatna próbka)
50 reakcji — 50 × 20 µl
200 reakcji — 200 × 20 µl

Niektóre zastosowania produktu mogą wymagać licencji, która nie jest zapewniana wraz z zakupem produktu. Produkt wyłącznie do zastosowań badawczych.

Reagents Provided (Dostarczane odczynniki)

Odczynnik	Liczba	Wielkość / ilość
Odwrotna transkryptaza FIREScript® FLEX H(-)	1	4000 U
Bufor reakcyjny RT 10× z DTT 2.0	1	125 µl
Inhibitor RNaz RiboGrip® (220 U/µl)	1	2000 U / 9 µl

Overview: Description (Przegląd: opis)

FIREScript® FLEX H(-) Reverse Transcriptase (RT) to zaprojektowana in silico polimeraza DNA zależna od RNA, która syntetyzuje komplementarną nić DNA na matrycy ssRNA lub ssDNA. Została opracowana z myślą o czułej syntezie cDNA i niezawodnym działaniu w wymagających warunkach.

Enzym działa w rozszerzonym zakresie temperatur 37–70°C i charakteryzuje się obniżoną aktywnością RNazy H, co pomaga chronić matryce RNA i umożliwia dokładną syntezę cDNA pełnej długości. Wysoka procesywność wspiera odczyt dłuższych fragmentów transkryptów, w tym z długich i złożonych matryc RNA.

FIREScript® FLEX H(-) RT wykazuje wysoką termostabilność: zachowuje aktywność po 30-minutowej ekspozycji na temperaturę 65°C, przy niewielkim wpływie na wartości Cq. Enzym zapewnia również stabilną pracę na blacie laboratoryjnym, nawet gdy przygotowana reakcja pozostaje przez dłuższy czas w temperaturze pokojowej, co może ograniczać zmienność i wspierać powtarzalność wyników.

Dzięki technologii Stability TAG — opatentowanej technologii stabilizacji polipeptydów firmy Solis BioDyne — enzym zachowuje stabilność w temperaturze pokojowej oraz 37°C przez okres do jednego miesiąca bez utraty aktywności. Ułatwia to transport w temperaturze otoczenia. Podczas przygotowywania reakcji enzym może pozostawać stabilny w temperaturze pokojowej do 24 godzin dzięki właściwościom warm-start. Reakcje można więc przygotowywać bez użycia lodu.

Połączenie odporności termicznej, ochrony RNA i wysokiej procesywności sprawia, że FIREScript® FLEX H(-) RT nadaje się do wymagających zastosowań, w tym do pracy z małą ilością RNA, RNA zdegradowanym lub o złożonej strukturze. W celu uzyskania optymalnych wyników producent zdecydowanie zaleca stosowanie inhibitora RNaz RiboGrip®.

[1] Kahre, O. i in., „Compositions for increasing polypeptide stability and activity, and related methods”, EP2501716B1 (2015) oraz US9321999B2 (2016).

Applications (Zastosowania)

Synteza pierwszej nici cDNA.
RT-PCR i RT-qPCR.
Analiza ekspresji genów.
Praca z małą ilością RNA lub RNA zdegradowanym.
Analiza długich i złożonych matryc RNA.
Sekwencjonowanie pojedynczych komórek.
Walidacja biomarkerów i opracowywanie testów.
Procedury wykorzystujące próbki zawierające inhibitory.

Properties (Właściwości)

Typ próbki: RNA.
Produkt końcowy: cDNA (pierwsza nić).
Format produktu: enzym, bufor reakcyjny i inhibitor RNaz w oddzielnych probówkach.
Enzym: odwrotna transkryptaza FIREScript® FLEX H(-).
Zakres temperatur pracy: 37–70°C.
Przechowywanie: standardowo −20°C. Tymczasowe przechowywanie w temperaturze pokojowej do jednego miesiąca nie powinno niekorzystnie wpływać na jakość odczynników.

Materiały graficzne producenta

Poniższe ilustracje i wykresy pochodzą ze strony producenta i przedstawiają zakres temperatur, syntezę długiego cDNA, szybkość syntezy, stabilność podczas pracy na blacie, tolerancję obróbki cieplnej, tolerancję inhibitorów oraz stabilność w temperaturze pokojowej.